Satura rādītājs:

Kā jūs varat noteikt DNS koncentrāciju no absorbcijas?
Kā jūs varat noteikt DNS koncentrāciju no absorbcijas?

Video: Kā jūs varat noteikt DNS koncentrāciju no absorbcijas?

Video: Kā jūs varat noteikt DNS koncentrāciju no absorbcijas?
Video: Un Aperçu du Syndrome de Tachycardie Orthostatique Posturale (POTS) 2024, Decembris
Anonim

DNS koncentrācija tiek novērtēts, izmērot absorbcija pie 260 nm, pielāgojot A260 duļķainības mērījums (mērīts ar absorbcija pie 320 nm), reizinot ar atšķaidīšanas koeficientu un izmantojot attiecību, ka A260 no 1,0 = 50 µg/ml tīra dsDNS.

Tāpat cilvēki jautā, kā jūs atrodat DNS koncentrāciju?

Lai noteiktu DNS koncentrāciju sākotnējā paraugā, veiciet šādu aprēķinu:

  1. dsDNS koncentrācija = 50 μg/mL × OD260 × atšķaidīšanas koeficients.
  2. dsDNS koncentrācija = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. dsDNS koncentrācija = 1,63 mg/ml.

Kā arī, kāda ir laba DNS koncentrācija? A labi kvalitāti DNS paraugam jābūt ar A260/A280 attiecība 1,7-2,0 un A260/A230 attiecība ir lielāka par 1,5, taču, tā kā dažādu metožu jutība pret šiem piesārņotājiem ir atšķirīga, šīs vērtības ir jāņem vērā tikai kā norādes par jūsu parauga tīrību.

Vai DNS šādā veidā absorbē pie 280 nm?

Absorbcijas attiecība pie 260 nm vs 280 nm ir parasti izmanto, lai novērtētu DNS proteīnu šķīdumu piesārņojums, jo olbaltumvielas (jo īpaši aromātiskās aminoskābes) absorbēt gaismas plkst 280 nm.

Kā jūs izmantojat NanoDrop DNS koncentrācijai?

Būtībā nanopiliens sniedz iespēju izvēlēties DNS , RNS, olbaltumvielas. Jums ir jāizvēlas DNS , pēc tam ielieciet 2 ΜL ūdens (mili Q priekšroka) atlasiet "Tukšs" un pēc tam ielieciet vēl 2 ΜL ūdens, lai apstiprinātu, ka mērījums ir 0. Pēc tam ievietojiet 2 ΜL sava parauga. Jūs saņemsiet mērījumu.

Ieteicams: