Kāpēc spektrofotometram ir jābūt iestatītam uz noteiktu viļņa garumu?

2024 Autors: Miles Stephen | [email protected]. Pēdējoreiz modificēts: 2023-12-15 23:38

Kad regulējat viļņa garums uz spektrofotometrs , tu ir mainot prizmas vai difrakcijas režģa stāvokli tā, ka atšķiras viļņu garumi gaismas ir vērsta uz spraugu. Jo mazāks ir spraugas platums, jo labāka instrumenta spēja izšķirt dažādus savienojumus.

Līdz ar to, pie kāda viļņa garuma tiks iestatīts spektrofotometrs?

Atkarībā no gaismas avota viļņa garuma diapazona to var iedalīt divos dažādos veidos: UV redzamais spektrofotometrs: izmanto gaismu ultravioletā diapazonā (185–400 nm) un redzamo diapazonu (400–400 nm). 700 nm ) elektromagnētiskā starojuma spektra.

Tāpat, kāpēc jums ir jākalibrē spektrometrs katru reizi, kad maināt viļņa garumu? Spektrofotometrs ir jābūt kalibrēts pret tukšo šķīdumu tā ka mērījumus pēc tam, kad tā var izmantot tukšā šķīduma absorbciju kā nulles atsauci. Vielas spējas absorbēt noteiktas gaismas gaismu viļņa garums.

pie kāda viļņa garuma ir jāņem rādījumi?

Ņem lasījumi ar 5 nm intervālu nedaudz pirms un pēc tam viļņa garums . Piemēram, ja maksimālā absorbcija tika atrasta pie 450 nm, tad, lai iegūtu precīzāku lasīšana no λmax, ņem absorbciju lasījumi pie 440, 445, 455 un 460 nm.

Kāpēc jūs mērāt šķīduma absorbciju pie 550 nm?

Olbaltumvielas reaģē ar vara joniem sārmainā stāvoklī risinājums veidot violetas krāsas kompleksu, kas absorbē gaismu plkst 550 nm . Tāpēc līdz mērīšana kompleksa koncentrācija, izmantojot A550 ( Absorbcija plkst 550 nm ), tu ir arī mērīšana olbaltumvielu koncentrācija.