Video: Ko jūs saprotat ar Southern blotting tehniku?
2024 Autors: Miles Stephen | [email protected]. Pēdējoreiz modificēts: 2023-12-15 23:38
A Southern blot ir metode, ko izmanto molekulārajā bioloģijā konkrētas DNS sekvences noteikšanai DNS paraugos. Dienvidu blotēšana apvieno ar elektroforēzi atdalītu DNS fragmentu pārnešanu uz filtra membrānu un sekojošu fragmentu noteikšanu ar zondes hibridizāciju.
Tātad, kas ir blotēšanas tehnika?
Blotēšanas metodes ir tas, ko zinātnieki izmanto, lai atdalītu šāda veida molekulas. Šūnās tie pastāv kā maisījums. Blotēšana parasti tiek veikta, ļaujot DNS, RNS vai olbaltumvielu maisījumam plūst cauri gēla plāksnei.
Otrkārt, kas ir ziemeļu un dienvidu blotēšana? Northern blot tiek darīts, lai noteiktu noteiktu RNS secību. Southern blot tiek darīts, lai noteiktu noteiktu DNS secību. Principā tās ir viena un tā pati procedūra ar nelielām atšķirībām dažādu mērķu dēļ.
Ņemot to vērā, kāpēc dienvidu blotēšana ir svarīga?
Dienvidu blotēšana . Dienvidu blotēšana ir paredzēts, lai sarežģītā maisījumā atrastu noteiktu DNS secību. Piemēram, Dienvidu blotēšana var izmantot, lai atrastu noteiktu gēnu visā genomā. Šai tehnikai nepieciešamais DNS daudzums ir atkarīgs no zondes lieluma un specifiskās aktivitātes.
Kāda ir pareizā notikumu secība Southern blotting?
Dienvidu blotēšanas tehnikā ir četri galvenie posmi: pirmajā posmā noņemiet paraugu DNS tiek sadalīts vai sagremots mazākos gabalos, izmantojot restrikcijas enzīmu. Pēc gremošanas, DNS fragmenti tiek atdalīti, izmantojot gēla elektroforēzi. Parasti šim nolūkam izmanto agarozes želeju.
Ieteicams:
Ko jūs saprotat ar augsnes organisko vielu?
Augsnes organiskā viela (SOM) ir augsnes organiskās vielas sastāvdaļa, kas sastāv no augu un dzīvnieku atkritumiem dažādās sadalīšanās stadijās, augsnes mikrobu šūnām un audiem un vielām, ko augsnes mikrobi sintezē
Ko jūs saprotat ar ūdens polāro dabu?
Ūdens ir “polāra” molekula, kas nozīmē, ka pastāv nevienmērīgs elektronu blīvuma sadalījums. Ūdenim ir daļējs negatīvs lādiņš () netālu no skābekļa atoma nesadalīto elektronu pāru dēļ, un daļēji pozitīvi lādiņi () ūdeņraža atomu tuvumā
Kāda ir zondes funkcija Southern blotā?
Pēc tam membrānu apstrādā ar nelielu DNS vai RNS gabalu, ko sauc par zondi, kas ir izstrādāta tā, lai tai būtu sekvence, kas ir komplementāra ar konkrētu DNS sekvenci paraugā; tas ļauj zondei hibridizēties vai saistīties ar konkrētu DNS fragmentu uz membrānas
Kas ir Southern blotting tehnika?
Southern blot ir metode, ko izmanto molekulārajā bioloģijā, lai noteiktu specifisku DNS secību DNS paraugos. Southern blotting apvieno ar elektroforēzi atdalītu DNS fragmentu pārnešanu uz filtra membrānu un sekojošu fragmentu noteikšanu ar zondes hibridizāciju
Kāpēc Southern blotting izmanto nitrocelulozes membrānu?
Sākotnējā protokolā Southern blot blotēšanai tika izmantota nitrocelulozes membrāna, bet pēdējā laikā blotēšanas procesā ir ieviestas neilona membrānas, jo tās spēj efektīvi saistīt lielāku daudzumu DNS, kas ļauj veikt Southern blot. ar mazāku daudzumu